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    補體介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗

    發(fā)布時間: 2021-11-01  點擊次數(shù): 988次
    材料與儀器

    小鼠
    Hank's液 抗小鼠Thy-1的單克隆抗體 補體 伊紅-Y染液
    解剖器械 平皿 不銹鋼網(wǎng) 試管 吸量管 尖吸管 載玻片 蓋玻片

    實驗步驟

    1.  小鼠胸腺細(xì)胞懸液的制備
     

    將 4~6 周齡小鼠采用頸椎脫臼法處死,取出胸腺放入已加入約4 ml冷Hank's液的平皿中,在100 目的不銹鋼網(wǎng)上研磨后,過篩,放入試管,離心1000 rpm,5 分鐘,用Hank’s液洗兩次。將沉淀的細(xì)胞重懸于Hank's液中,配成1×107 /ml細(xì)胞懸液。
     
    2.  取試管3 支,標(biāo)明順序,依據(jù)下表依次加入1×107 /ml胸腺細(xì)胞懸液、抗小鼠Thy-1 的單克隆抗體(最適稀釋度)及Hank's液,放入37 ℃水浴30 分鐘。



    3.  取出后每管加入1 %伊紅-Y 染液1 滴,混勻,室溫放置2 分鐘。
     
    4.  重新混勻后分別在一張載玻片上滴片,加蓋玻片鏡檢。先在低倍鏡下觀察,再用高倍鏡觀察,比較3 管中細(xì)胞死活情況。



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